游离脂肪酸激活HaCat细胞表面TLR受体并促进创面愈合的初步研究

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目的:观察长链游离脂肪酸对体外培养的角质形成细胞的作用,探讨其促进创面愈合的可能机制.方法:①体外培养HaCat细胞,实验分为N、PA、SA、LPS四组,N组为正常对照组,软脂酸(Palmitic Acid,PA)75μmol/L、硬脂酸(Stearic Acid,SA)750μmol/L、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)500 ng/L与HaCat细胞共培养72h组分别为PA组、SA组、LPS组;②PA、SA与角质形成细胞共培养72h检测对HaCat细胞NF-κB、MMP-3、MMP-9、VEGF表达的影响.通过免疫印迹法(Weston blot)检测PA、SA、LPS对HaCat细胞TLR2、TLR4、NF-KB表达的影响;Real-Time PCR方法检测对HaCat细胞内NF-κB、MMP-3、MMP-9、VEGF 表达的影响.结果:SA、LPS激活细胞表面TLR后可以明显促进细胞表面TLR2、TLR4表达及促进细胞内NF-κB,MMP-3、MMP-9、VEGF等细胞因子的表达,从而发挥促进创面愈合的作用.PA促进HaCat细胞内MMP-3、MMP-9、VEGF表达无明显影响(P>0.05).结论:SA可促进角质形成细胞分泌MMP-3、MMP-9、VEGF等因子促进创面愈合;其机制可能为:SA作用于TLR激活NF-κB信号传导通路促进细胞释放MMP3、MMP-9、VEGF等因素有关.
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