【摘 要】
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目的:观察引火汤(YHT)对慢性应激诱导的双侧卵巢摘除(OVX)小鼠抑郁样行为的影响并探索其基于雌二醇(E2)/雌激素受体β(ERβ)信号通路的作用机制.方法:实验分两部分完成,第一部分将小鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(OVX),阳性药组(E2,0.13 mg·kg-1)和引火汤组(YHT,23.4 g·kg-1).采用OVX联合慢性不可预知性温和刺激(CUMS)方法复制OVX.双侧卵巢摘除术后第8天,各组小鼠开始CUMS并开始给药,强迫游泳(FST),悬尾(TST),旷场(OFT)3种行为学实
【机 构】
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黑龙江中医药大学佳木斯学院,黑龙江佳木斯154007;黑龙江中医药大学中药学博士后流动站,哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,哈尔滨150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,哈尔滨15004
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目的:观察引火汤(YHT)对慢性应激诱导的双侧卵巢摘除(OVX)小鼠抑郁样行为的影响并探索其基于雌二醇(E2)/雌激素受体β(ERβ)信号通路的作用机制.方法:实验分两部分完成,第一部分将小鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(OVX),阳性药组(E2,0.13 mg·kg-1)和引火汤组(YHT,23.4 g·kg-1).采用OVX联合慢性不可预知性温和刺激(CUMS)方法复制OVX.双侧卵巢摘除术后第8天,各组小鼠开始CUMS并开始给药,强迫游泳(FST),悬尾(TST),旷场(OFT)3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清、脑组织E2水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测芳香化酶(Cyp19)基因转录,免疫组织化学法(IHC)检测海马齿状回ERα和ERβ表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑内总ERα和ERβ蛋白水平.第二部分实验分Sham,OVX,YHT和阻断剂组(Y+B,23.4 g·kg-1+100 μg·kg-1),Y+B组小鼠在引火汤灌胃同时采用隔天腹腔注射方式的给予ERβ阻断剂(PHTPP),3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化.结果:与Sham组比较,OVX组小鼠不动时间显著增加、水平运动及垂直运动水平显著降低(P＜0.01),血清和脑内E2显著降低(P＜0.01),脑内Cyp19 mRNA表达显著降低(P＜0.01),海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著降低(P＜0.01);与OVX组比较,E2组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加(P＜0.01),血清E2显著升高(P＜0.01),脑内Cyp 19 mRNA表达差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著升高(JP＜0.01),YHT组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加(P＜0.01),血清E2未见升高,脑内E2明显升高(P＜0.01),脑内Cyp19 mRNA表达显著增加(P＜0.01),海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达均显著升高(P＜0.05,P＜0.01).PHTPP可阻断引火汤对OVX小鼠在FST,TST,OFT实验中的作用.结论:引火汤促进脑内源性雌激素合成和释放,激活E2/ERβ信号通路可能是其改善慢性应激诱导的OVX小鼠抑郁样行为关键机制之一.
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