【摘 要】
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目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)的新分离方法及其作为骨组织工程(tissue engineering bone,TEB)种子细胞的特点。方法
【机 构】
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济南军区总医院骨病科,第三军医大学西南医院骨科,
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目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)的新分离方法及其作为骨组织工程(tissue engineering bone,TEB)种子细胞的特点。方法处理脐带组织,将含有杂质较多的组织去除,使剩余组织尽可能为Wharton’s jelly。采用组织块培养皿(实验组)及普通培养皿(对照组)分别分离脐带间充质干细胞,统计组织块培养成功率及获取原代脐带间充质干细胞的数量。流式细胞仪检测3代细胞的表面分子,并进行成骨、成软骨、成脂诱导以鉴定其多向分化潜能。将获取的3代脐带间充质干细胞与DBM骨体外构建组织工程骨,并检测细胞与组织工程骨的黏附率,激光共聚焦及总蛋白检测来确定细胞在支架材料上的生长情况。结果实验组与对照组培养12 d时组织块漂浮数为0 vs 13;培养成功率为(86.0±2.7)%vs(44±4)%,细胞数量为(24.7±3.6)×104vs(5.1±1.0)×104,2组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。P3细胞阳性表达CD44+、CD73+、CD90+、CD105+,阴性表达CD34+、CD45+,具有向成骨、脂肪、软骨分化潜能。细胞在DBM上的黏附率为(81.3±4.7)%,相容性好,构建TEB上的种子细胞随时间增殖。结论新分离方法可以简化、规范操作过程,提高组织块的利用率,获取大量细胞(提高15~20倍)。细胞与DBM相容性好,可成功构建TEB。
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