【摘 要】
：
目的 分析DNA甲基化酶1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响.方法分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW1116细胞,PCR和限制性内切酶证实转染结果,以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况.定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c-myc、p16INK4A基因的表达.结果经G418筛选得到稳定转染DNMT1基因的结
【机 构】
：
200001,上海第二医科大学附属仁济医院上海市消化疾病研究所,200001,上海第二医科大学附属仁济医院上海市消化疾病研究所,200001,上海第二医科大学附属仁济医院上海市消化疾病研究所,2000
论文部分内容阅读
目的 分析DNA甲基化酶1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响.方法分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW1116细胞,PCR和限制性内切酶证实转染结果,以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况.定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c-myc、p16INK4A基因的表达.结果经G418筛选得到稳定转染DNMT1基因的结肠癌细胞系,且分别在该转染有正义和反义质粒的细胞系中,DNMT1蛋白表达上调和下调.同时发现转染正义DNMT1的细胞中hMLH1、hMSH2及c-myc的表达降低,而转染反义DNMT1的细胞中hMSH2的表达明显增强.各组细胞p16INK4A基因的表达差异不明显.结论DNMT1基因调控人结肠癌细胞中肿瘤相关基因的表达。
其他文献
Fas(APO 1/CD95 )属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，是一种凋亡信号受体。Fas及其配体 (FasL)相互作用，是引起细胞凋亡的主要途径之一。Fas基因启动子区域-670位点A/G多态性位于核转录元件GAS(interferon-gamma activatedsite)中，能引起GAS的DNA序列改变，可影响Fas的表达。
胰岛素抵抗是由于肝脏、脂肪和肌肉等组织对胰岛素生物效应的反应性降低而产生的一系列临床表现。随着年龄的增长，胰岛素抵抗的发生呈增高趋势，对于胰岛素抵抗发病率随增龄而增加的机制目前还不清楚。随着近些年对过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator-activatedreceptorγ，PPARγ)功能认识的进展，研究PPARγ与胰岛素抵抗的关系成为当今的热点。衰老过程中
目的 分析 4 6例输尿管结石患者在ESWL失败后改行钬激光碎石治疗的原因。方法 4 6例输尿管结石ESWL 116次 ,平均为 2 .5次。结果 钬激光碎石术 ,术中发现多数结石不同程
目的 探讨膀胱移行细胞癌中热休克蛋白 2 7(HSP2 7)和 DNA拓扑异构酶 α(To Po α)的表达。方法 SP免疫组织化学染色 ,检测 85例膀胱癌患者病灶组织中 HSP2 7和 To Po α
目的 本研究旨在探索平均年有效剂量为6.4 mSv的阳江天然放射性高本底辐射的致癌危险,为小剂量电离辐射致癌危害概率估计和预测提供对人类的直接观察资料.方法癌症死亡资料收集采用前瞻性调查方法,1979～1986年的资料从动态队列中收集,1987～1998年资料从固定队列获得.两组资料通过记录连接法合并.外照射个人剂量是根据辐射剂量仪测得的环境(室内、外)辐射水平,并考虑不同性别年龄的居留因子来估算
从疑为流感的病死鸭肝、脾和肾脏中分离到1株病毒,该病毒能凝集鸽红细胞,并能被康复鸭血清、新城疫标准阳性血清抑制,但不能被EDS、禽流感H5、H7、H9血清抑制;电镜观察见到形
目的测定缓解期哮喘患儿支气管反应性及小气道功能，探讨支气管反应性与小气道功能及临床缓解时间的关系。方法对39例缓解期哮喘患儿进行支气管激发试验，用传统方法测定肺通气功能。比较最大呼气中段流量(maximal mid-expiratory flow，MMEF)<80%患儿和MMEF≥80%患儿的支气管激发试验阳性率，以及临床缓解时间≤12个月和>12个月的患儿支气管激发试验阳性率。结果缓解期哮喘患儿
[目的]探讨美国国家职业安全卫生研究所提出的手工作业提举指数(LI)与下背痛患病率的关系.[方法]在3个具有典型提举作业的工厂中采用流行病学横断面调查方法,利用NIOSH提出的
目的 观察内窥镜下前路颈椎间盘切除及椎间融合术的临床疗效.方法自2002年10月,对26例患者实施内窥镜下前路颈椎间盘切除及椎间融合术.其中获得3个月以上随访者16例,男12例,女4例;年龄23～65岁,平均53.2岁.颈椎外伤合并椎间盘突出症3例,脊髓型颈椎病8例,孤立性颈椎后纵韧带骨化2例,神经根型颈椎病3例.单间隙4例,双间隙12例.病变节段:C3,4 2个,C4,5 11个,C5,6 13
目的 根据循证医学原理,采用计算机辅助的小儿阑尾炎评分系统对小儿阑尾炎病例进行分析,寻找增加诊断准确率的新方法.方法检索文献,收集小儿急性阑尾炎的诊断证据,得出经评估在诊断中具有显著意义的征候,以Bayes条件概率数学模型,QBASIC语言编制计算机程序.采用该程序对1999年1月～2003年6月总计237例入院诊断为急性阑尾炎小儿病例进行分析.结果未手术组83例,诊断概率均值为0.1021±0.