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目的:构建Heymann肾炎致病原受体相关蛋白(RAP)全长和羧基端多肽的原核融合表达载体,表达并纯化相应的融合蛋白。方法:通过RT—PCR法获得RAP全长的cDNA,将其与pGEM—T克隆载体连接并转化,对阳性克隆进行测序分析,设计针对RAP全长和羧基端带有&嘏I和XhoI双酶切位点的特异引物,通过PCR合成RAP全长359个氨基酸和羧基端108个氨基酸的DNA。纯化后与含有GST的pGEX-4T-1载体体外重组连接,亚克隆到感受态细胞BL21中,经IPTG诱导,表达的融合蛋白通过GST—Sepharo