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用高压液相色谱（HPLC）分析某种原料药，采用KH2PO4缓冲液（pH值6．5）和甲醇组成的流动相进行梯度洗脱时，连续损坏两根新的色谱柱。经柱外梯度洗脱模拟实验发现：流动相pH值随着有机相比例的上升而上升，最终超过色谱柱允许的pH值上限而使色谱柱损坏；同时，当有机相的比例超过80％（体积比）时，有磷酸盐晶体析出，发生堵塞，从而加重了色谱柱的损坏。所以，在梯度洗脱时，应该做柱外模拟试验，确定有机相最高比例，以保护色谱柱。