【摘 要】
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目的:探索长链非编码RNA Colon cancer associated transcript-1 (CCAT1)在结直肠癌发生发展过程中的作用及可能的分子机制.方法:通过反转录-荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测15
【机 构】
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南京医科大学附属杭州医院 浙江杭州310000杭州市第一人民医院 浙江杭州310000;南京医科大学附属杭州医院 浙江杭州310000;杭州市第一人民医院 浙江杭州310000;
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目的:探索长链非编码RNA Colon cancer associated transcript-1 (CCAT1)在结直肠癌发生发展过程中的作用及可能的分子机制.方法:通过反转录-荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测15对结直肠癌组织和相应的癌旁组织中CCAT1的表达水平;通过RT-qPCR,比较结直肠癌细胞系RKO细胞和正常结肠细胞NCM460中CCAT1表达量的差异;在结直肠癌细胞系RKO细胞中,我们敲低了CCAT1的表达水平,并用CCK8法和Transwell侵袭实验分别检测了RKO细胞增殖能力和侵袭能力的变化.通过全转录组测序,我们分析了在CCAT1沉默后差异表达的基因,并通过挽救实验和过表达实验进一步验证可能的分子机制.结果:结直肠癌组织和RKO细胞中的CCAT1表达水平均显著高于对应的癌旁组织和NCM460细胞(P＜0.001,P＜0.005).结直肠癌细胞系RKO细胞的增殖能力和侵袭能力随着CCAT1水平的降低而显著下降(P＜0.005).全转录组测序结果显示,在CCAT1被沉默后,miR-210-5p的表达量显著升高(P＜0.005).在细胞增殖能力随CCAT1表达水平降低的RKO细胞中转入miR-210-5p inhibitors后,细胞增殖能力显著提高(P＜0.05).相对的,在正常RKO细胞中转入miR-210-5p mimics以后,细胞增殖能力显著下降(Pc＜0.05).结论:CCAT1通过海绵吸附miR-210-5p促进结直肠癌的进展,有望成为结直肠癌诊断治疗的新靶点.
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