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目的:构建人肿瘤坏死因子样分子1A(TLlA)原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TLlA基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQE-TLlA,并转化大肠杆菌M15[pREP4]。IPTG诱导目的蛋白表达并进行Western blotting鉴定;镍离子亲和层析柱(Ni^2+ -NTA)纯化靶蛋白。结果:目的基因经酶切其结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GenBank登录的序列(登录号AF52