两种方法培养骨质疏松症小鼠脂肪干细胞的比较

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwaszxzx
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背景:获得充足的脂肪干细胞是自体移植修复骨质疏松症骨缺损的前提,因此如何高效、简便、经济的获得自体原代脂肪干细胞是治疗骨质疏松症的关键。目的:采用组织块法和胶原酶消化法体外培养骨质疏松症小鼠脂肪干细胞,并对两种培养方法进行比较分析。方法:切除雌性C57BL/6小鼠双侧卵巢,制作骨质疏松模型,造模成功后取小鼠皮下脂肪组织,分别采用组织块法和胶原酶消化法分离培养脂肪干细胞。应用流式细胞仪检测第3代脂肪干细胞表面特异性抗原;培养7 d后,检测细胞产量;检测第3代脂肪干细胞的增殖;检测第4代脂肪干细胞的成脂及成骨分化能力。结果与结论:①组织块法培养第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(15.22±1.85)%、(75.55±3.36)%、(83.48±4.22)%,胶原酶消化法第3代细胞CD34、CD146、Sca-1表达率分别为(13.46±2.21)%、(76.62±2.47)%、(84.84±3.56)%;②组织块法每毫克脂肪组织获得的细胞产量高于胶原酶消化法(P<0.05);③培养24 h后,组织块培养法的细胞增殖率高于胶原酶消化法;④两种方法得到的脂肪干细胞均可向脂肪细胞和成骨细胞方向分化,两组间成脂量及成骨量比较差异无显著性意义(P>0.05);⑤结果表明,组织块法比胶原酶消化法更适合体外培养脂肪干细胞,可为骨质疏松症患者自体移植脂肪干细胞治疗骨质疏松性骨折和骨缺损研究提供充足的细胞来源。
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