gfP基因甘蓝质体表达载体构建及原核表达分析

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hj525761224
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以甘蓝自交系‘03097’为试材,PCR扩增并克隆了甘蓝质体的trnI-trnA基因区段,利用该基因区段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建了甘蓝质体定点转化载体,并进行了原核表达分析。结果表明,所扩增的基因区段大小为2.7kb。进行序列分析后,经酶切、连接和转化,构建成含Prrn-gfp-aadA—TpsbA表达盒的质体表达载体,酶切鉴定表明,所构建载体符合预期设计;gfP基因能够在质体特异性启动子Prrn及终止子TpsbA的调控下高水平表达,表达量约占总可溶性蛋白的41.0%,包涵体占菌体蛋白的3
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