miR-640通过抑制SLIT1介导Wnt/β-catenin通路促进脑胶质瘤对替莫唑胺的耐药

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[目的]评价miR-640介导Wnt/β-catenin通路对脑胶质瘤耐药细胞增殖、侵袭及替莫唑胺(temazolamide,TMZ)敏感性的影响。[方法]利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定脑胶质瘤细胞内miR-640的表达。U87/TMZ细胞分为NC inhibitor组、 miR-640 inhibitor组和miR-640 inhibitor+si-SLIT1组。用不同浓度(15、30、60、120、240、480和960μmol/L)TMZ处理细胞,检测细胞对TMZ的耐药性;运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell实验检测U87/TMZ细胞增殖活力和侵袭力;用双荧光素酶报告基因实验验证miR-640与SLIT1的靶向关系。采用Western blot检测Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白表达水平。[结果] miR-640在脑胶质瘤细胞中高表达,转染后miR-640 inhibitor组的miR-640表达水平、侵袭细胞数目(57±23 vs 153±31)、IC50值(131.61±8.97 vs 293.33±11.28)、增殖率(18.48±4.23vs 43.84±8.94)均比NC inhibitor组低(P<0.05)。miR-640靶向调控SLIT1的表达,miR-640 inhibitor+siSLIT1组β-catenin、c-myc、Cyclin D1蛋白表达水平均高于miR-640 inhibitor组(P<0.05)。[结论]miR-640通过SLIT1介导Wnt/β-catenin通路促进脑胶质瘤增殖、侵袭及对替莫唑胺的耐药性。
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