在贮存骨髓涂片中提取DNA进行白血病患者FMS样酪氨酸激酶3基因突变检测的可行性

来源 :白血病·淋巴瘤 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Play_pig
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目的 研究在贮存骨髓涂片中提取微量DNA的可行性,探索贮存骨髓涂片中提取微量DNA检测FMS样酪氨酸激酶3-内部串联重复突变(FLT3-ITD)的应用价值.方法 选取79份-20℃保存1~5年的急性白血病(AL)骨髓涂片,分别用Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚:氯仿:异戊醇法、苯酚:氯仿:异戊醇法提取微量DNA,同时以10例非恶性血液病患者骨髓涂片作为对照.并采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增FLT3-ITD,扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测两组患者的FLT3-ITD.结果 苯酚:氯仿:异戊醇法能成功提取贮存骨髓涂片微量DNA,Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚:氯仿:异戊醇法未能提取到DNA(χ2=190.722,P=0.000).结论 使用苯酚:氯仿:异戊醇法可在贮存骨髓涂片中提取微量 DNA,可用于进行回顾性分子生物学研究,而Chelex-100法、Chelex-100联合苯酚:氯仿:异戊醇法不能提取贮存骨髓涂片微量DNA.
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