【摘 要】
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目的 建立一种基于核酸适配体检测玉米中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的方法.方法 以微孔板为载体,采用偶联生物素和Cy3荧光标记的核酸适配体与OTA的特异性结合,而与偶联黑洞淬灭探针(black hole quencher 2,BHQ2)的互补序列无法配对,导致荧光值变化从而实现对OTA的定量检测.结果 优化的条件为链亲和素质量浓度为100μg/mL,核酸适配体浓度为200 nmol/L,互补序列浓度为400 nmol/L,OTA在0.05～10.00 ng/mL范围具有较好的线性关系.
【机 构】
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福建卫生职业技术学院,福州 350101
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目的 建立一种基于核酸适配体检测玉米中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的方法.方法 以微孔板为载体,采用偶联生物素和Cy3荧光标记的核酸适配体与OTA的特异性结合,而与偶联黑洞淬灭探针(black hole quencher 2,BHQ2)的互补序列无法配对,导致荧光值变化从而实现对OTA的定量检测.结果 优化的条件为链亲和素质量浓度为100μg/mL,核酸适配体浓度为200 nmol/L,互补序列浓度为400 nmol/L,OTA在0.05～10.00 ng/mL范围具有较好的线性关系.与赭曲霉毒素B、黄曲霉毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的交叉反应率均低于1％,玉米样品中添加OTA的平均回收率为89.0％～93.8％.结论 该方法快速、准确、灵敏,交叉反应率低,可用于样品中OTA的分析检测.
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