目的基于流动小室的构架,建立一种用以研究细菌在呼吸道上皮细胞黏附的体外模型。方法以2 mg/mL牛胶原蛋白预包被流动小室后,接种1×10⁵个HBE细胞,含20%血清的RPMI1640培养基,37℃,5%CO₂孵箱培养24 h铺满底部后用于实验;以流动小室中细胞数量为评价指标,正交设计考察流速、流动时长和流动相成分对细胞模型的影响,筛选最优实验条件;以正交实验结果为条件,细菌黏附量为指标,与常规用于细菌细胞黏附的培养板方法相比较,分别于2×10⁸、10⁸、5×10⁷、2.5×10⁷CFU/mL接种浓度下与细胞进行黏附实验,判定流动小室是否为细菌细胞黏附研究的可靠模型;以SYTO9荧光标记细菌的方法表征黏附于细胞的细菌量。结果优化得到最佳实验条件,影响因素主次为流速>流动时长>流动相组成,方差分析结果显示,流速和流动时长影响因素有显著差异（P<0.05）,流动相组成无显著差异（P>0.05）。荧光染色后,该模型可实现细菌在呼吸道上皮细胞上黏附的荧光实时观察;细菌黏附的定量结果显示,随着感染复数增大,流动小室模型与常规培养板方法均检测出黏附细菌的增多,且呈线性关系;但同一感染复数下常规培养板方法所检测出的黏附菌量与流动小室模型相比显著增多（P<0.05）。结论在适宜的流速、流动时长下,该模型可用于研究细菌在呼吸道上皮细胞上黏附,并且较常规培养板方法具有更贴近体内环境、准确度高、可实时观察等优点。