RNAi介导线粒体融合素2基因沉默导致BALB/c小鼠葡萄糖代谢紊乱和胰岛素抵抗

来源 :中华内分泌代谢杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kmweiran
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目的 研究RNA干扰(RNAi)介导线粒体融合素2(mitofusin-2,Mfn2)基因沉默对BALB/c小鼠葡萄糖代谢和胰岛素敏感性的影响.方法 构建带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的Mfn2短发卡RNA质粒载体(Mfn2 shRNA)和阴性对照质粒载体(HK).44只BALB/c小鼠分为转染组(Mfn2)和阴性对照组.将含有75μg质粒溶液1.5 ml以流体力学法注入小鼠体内.质粒注射5 d后,采用腹腔葡萄糖耐量和胰岛素耐量试验观察Mfn2基因干扰对小鼠葡萄糖代谢和胰岛素敏感性的影响;采用氚标记葡萄糖(3-[~3H]-葡萄糖)通过尾静脉注射到小鼠体内,留取血标本,液体闪烁计数仪测定标本放射性浓度,计算小鼠肝脏葡萄糖生成率;Western印迹法检测肝脏组织中Mfn2蛋白表达.结果 与阴性对照组小鼠比较,Mfn2组小鼠肝脏组织Mfn2蛋白表达明显减少(8.05±0.15对8.56±0.01,P<0.05),空腹血糖升高[(6.95±0.83对4.68±0.29)mmol/L,P<0.05],胰岛素敏感性下降,肝脏葡萄糖生成增加[(49.43±16.31对24.91±4.07)μmol·kg~(-1)·min~(-1),P<0.05].结论 下调Mfn2基因表达使BALB/c小鼠葡萄糖代谢异常和胰岛素抵抗,Mfn2基因在维持体内葡萄糖代谢稳态中起重要作用。

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