【摘 要】
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目的 研究鞘氨醇激酶1(SPK1)对人肝癌耐药细胞株BEL-FU生物学特性的影响.方法 将SPK1siRNA基因(Ad-H 1-SPK1)及野生型SPK1基因(Ad-SPK1wT)导入人肝癌耐药细胞株BEL-FU.用试剂
【机 构】
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教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室,山东大学齐鲁医院消化科,青岛市立医院消化科,青岛大学医学院附属医院医政部
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目的 研究鞘氨醇激酶1(SPK1)对人肝癌耐药细胞株BEL-FU生物学特性的影响.方法 将SPK1siRNA基因(Ad-H 1-SPK1)及野生型SPK1基因(Ad-SPK1wT)导入人肝癌耐药细胞株BEL-FU.用试剂盒检测SPK酶活性,MTT法检测其对肝癌细胞凋亡的影响,Transwell法测定肝癌细胞侵袭力,Western-blot方法检测多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达水平的变化.结果 导入Ad-SPK1wT增强肝癌细胞SPK活性,转染SPK1 siRNA(Ad-H 1-SPK1)抑制肝癌细胞SPK活性；肝癌细胞导入SPK1后,抑制SPK特异性抑制剂N,N,-二甲基鞘氨醇(Dimethyl sphingosine,DMS)引起的肝癌细胞凋亡并促进肝癌细胞迁移和增加多药耐药蛋白( MRP1)的表达；阻断SPK1则显著促进细胞凋亡和明显抑制肝癌细胞迁移,且多药耐药蛋白(MRP1)表达量明显降低.结论 SPK1的活性与肝癌细胞的凋亡、侵袭力及多药耐药密切相关,阻断SPK1可为肝癌治疗提供新的靶点和策略.
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