目的观察体外扩增自然杀伤(NK)细胞的表型,探讨其对不同乳腺癌细胞株的杀伤作用及其机制。方法抽取健康志愿者外周血15mL,分离单个核细胞,与基因修饰的K562细胞共培养,应用流式细胞仪采用Calcein释放法检测NK细胞的表型,计算NK细胞对乳腺癌细胞株MDA-MB231和MCF-7的杀伤率。结果扩增后NK细胞、自然杀伤T细胞(NKT细胞)、T淋巴细胞的平均含量分别为(74.2±12.9)%、(19.1±10.8)%、(4.3±0.8)%,与扩增前的(12.6±6.2)%、(7.7±2.7)%、(55.5±8.8)%比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。扩增后NK细胞的杀伤细胞活化受体NKG2D、NKp30、NKp44和DNAX辅助分子1(DNAM-1)的表达阳性率分别为(83.4±4.3)%、(80.6±5.1)%、(20.9±2.7)%和(87.2±3.9)%,均显著高于扩增前的(17.0±2.1)%、(18.0±1.8)%、(1.4±0.4)%和(50.1±4.9)%(P值均<0.05)。扩增后NK细胞对MDA-MB231、MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(61.7±8.0)%、(66.1±3.5)%,均显著高于扩增前的(28.2±3.2)%、(29.6±2.8)%(P值均<0.05)。扩增后主要活化分子的对照抗体、抗NKG2D抗体、抗NKp30抗体、抗NKp44抗体、抗NKp46抗体、抗DNAM-1抗体和联合全部抗体抑制NK细胞对MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(69.3±4.2)%、(43.6±3.5)%、(49.3±2.8)%、(47.1±4.9)%、(65.3±5.6)%、(41.1±3.8)%和(19.8±2.1)%。结论扩增后NK细胞表达部分活化分子增强,其对乳腺癌细胞的杀伤作用明显增强,扩增后NK细胞具有增强的抗肿瘤活性可能与这些活化分子高表达有关。