【摘 要】
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目的 探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区来源的成血-血管细胞增殖、分化和迁移的影响.方法 联合应用抗小鼠CD34、Flk1单克隆抗体(单抗)的磁珠
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科
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目的 探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区来源的成血-血管细胞增殖、分化和迁移的影响.方法 联合应用抗小鼠CD34、Flk1单克隆抗体(单抗)的磁珠,从孕11 d BALB/c鼠胚胎AGM区分离培养成血-血管干细胞,并同时培养AGM区来源基质细胞,用流式细胞术对所分离细胞进行表型鉴定.用免疫组织化学法检测基质细胞表达Shh蛋白的情况;借助Transwell细胞共培养体系,观察在AGM的基质细胞共培养体系中,不同浓度的Shh活性肽及其单抗对成血-血管干细胞增殖、细胞周期、迁移及向内皮细胞定向分化的影响.结果 AGM区基质细胞高表达Shh蛋白(阳性率高达90%以上),并可促进成血-血管干细胞增殖,其增殖效应可被10.00 μg/mlShh单抗阻断;0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白与AGM区基质细胞共培养的成血-血管干细胞,可使成血-血管干细胞长时间增殖,并促进细胞迁移,但并不诱导细胞凋亡与分化;而当0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白作用于单独培养的成血-血管干细胞,细胞经过短时间增殖后,随后发生凋亡并向内皮细胞分化.结论 Shh信号通路参与了成血-血管干细胞的增殖、分化、凋亡及迁移等生物学特性的调控,但其具体作用存在时空的差异,AGM区微环境对Shh信号通路具有整合和调试的作用.
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