【摘 要】
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为高效表达几丁质酶基因tachi1,研究Tachi1的酶学性质。采用PCR技术从棘孢木霉中克隆了几丁质酶基因tachi1并与pEHisTEV原核表达载体融合,转化大肠杆菌BL21。经异丙基-β-D-
【基金项目】
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山东省自然科学基金“生防木霉菌的分子标记技术研究”（ZR2010CM040）, 青岛农业大学高层次人才启动基金“木霉菌几丁质酶新基因克隆表达及酶学性质分析”（631108）
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为高效表达几丁质酶基因tachi1,研究Tachi1的酶学性质。采用PCR技术从棘孢木霉中克隆了几丁质酶基因tachi1并与pEHisTEV原核表达载体融合,转化大肠杆菌BL21。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导,获得了以包涵体形式高效表达的Tachi1。包涵体经洗涤、溶解、复性和纯化后获得了高纯度的Tachi1。复性后的Tachi1具有较高的几丁质酶活性,该几丁质酶反应的最适温度为50℃,最适pH5.5。几丁质酶在30～35℃下稳定,在pH3～7之间几丁质酶有较高活性。
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