孕妇生殖道念珠菌感染与所生新生儿感染性疾病相关性调查研究

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  【摘要】 目的:调查研究孕妇生殖道念珠菌感染对新生胎儿感染性疾病的相关性,为围产期的保健提供比较科学的参考依据。方法:选取本院2013年3月-2014年3月实施产前检查发现生殖道遭念珠菌感染的晚期产妇1027例作为研究对象,将其阴道分泌物进行念珠菌培养,将检验结果呈阳性的患者作为对照组,随机再抽取相同人数念珠菌检验呈阴性的产妇作为观察组,随访两组产妇的新生儿感染性疾病的发生情况。结果:1027例孕妇的阴道分泌物培养结果显示,念珠菌呈阳性患者102例,检出率为9.93%,其中白色念珠菌75例,占所有的念珠菌感染者的73.53%;光滑念珠菌20例,所占比例为19.61%,克柔假丝酵母菌7例,所占比例为6.86%。随访发现,念珠菌呈阳性的产妇新生儿的感染性疾病的发生率为8.82%,念珠菌呈阴性的产妇新生儿感染性疾病的发生率为1.96%,两组比较差异有统计学意义( 字2=4.7084,P=0.0300)。结论:围产期孕妇生殖道发生念珠菌感染与新生儿出现感染性疾病具有相关性,因此应该重视对孕妇围产期生殖道念珠菌的培养,尽量做到早发现、早治疗,从而保证母婴的生命安全和身体健康。
  【关键词】 孕妇; 生殖道; 念珠菌感染; 新生儿感染性疾病
  doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.23.025
  孕妇生殖道的感染危害程度要远高于非孕妇的患者,生殖道的常见的病菌感染有念珠菌感染,念珠菌感染会导致孕妇羊膜腔内出现感染、胎膜早破、早产低出生儿、甚至流产和死胎不良妊娠结局,也可经垂直传播使胎儿宫内感染、胎儿先天性病及新生儿感染等发生,而且新生儿感染性疾病发病率仍较高、是新生儿重要死因[1];但关于孕妇生殖道念珠菌感染与新生儿感染性疾病的相关性研究很少。目前国内及广东省内关于孕妇生殖道念珠菌感染与所生产新生儿感染性疾病相关性的研究报道较少,惠州地区未见相关研究公开报道。加强围产保健对孕妇生殖道念珠菌感染的监测,提高新生儿生育、生存质量,减少新生儿感染性疾病的发病率与死亡率,为围产期保健提供科学的参考依据,有较高的社会效益及经济效益。本课题通过对生殖道念珠菌感染的孕妇及所生产的患有感染性疾病的新生儿进行回顾性调查研究,对孕妇生殖道念珠菌感染的发生率、所生产的患有新生儿感染性疾病的发病率、死亡率以及各种主要临床表现进行分析,了解其中的相关性,为围产期保健提供科学的参考依据。本文对本院2013年3月-2014年3月的1027例住院产妇的宫颈分泌物和阴道分泌物做常规细菌培养,现将结果报道如下。
  1 资料与方法
  1.1 一般资料 选取本院2013年3月-2014年3月实施产前检查发现生殖道遭念珠菌感染的晚期产妇1027例作为研究对象,将其阴道分泌物进行念珠菌培养,将检验结果呈阳性的患者作为对照组,随机再抽取相同人数念珠菌检验呈阴性的产妇作为观察组。对照组102例产妇中,经阴道分泌物念珠菌培养结果显示呈阳性,年龄22~34岁,平均(32.3±2.1)岁;孕龄37~41周,平均(39.2±0.8)周;体重49.3~62.1 kg,平均(54.6±2.3)kg。观察组102例产妇中,经阴道分泌物念珠菌培养结果呈阴性,年龄26~37岁,平均(32.4±0.6)岁;孕龄36~41周,平均(39.2±0.5)周;体重48.7~65.2 kg,平均(56.4±2.7)kg。两组孕妇的年龄、孕龄、体重等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
  1.2 仪器的选用 本次试验采用的仪器为超高倍显微镜图像分析系统。
  1.3 方法
  1.3.1 标本的采集 采用无菌的棉拭子插入产妇的宫颈口1 cm左右的部位,然后转动1周,停留3~5 s之后取出,放置于无菌管内进行密封保存,然后再送往检验室检验。
  1.3.2 念珠菌的培养方法 念珠菌感染的实验室检测方法:(1)盐水直接涂片法(初筛)。棉拭子插入阴道1 cm处,然后转动1周,停留3~5 s取出,或者使用窥阴器取宫颈分泌物,然后将标本置入预先加入0.5 mL氯化钠的青霉素瓶内,作悬滴涂片和革兰染色,然后将二者的镜检结果进行记录,然后将青霉素瓶、瓶内剩余液体、棉拭子均放置于室内24 h左右,室内温度在22~26 ℃,然后制作悬滴涂片在高倍显微镜下进行观察。检验呈阳性者,用接种环挑取生长物1环,与凹玻片中50 μL血清进行混合,充分混合之后将盖玻片盖上,稍微轻压让混合物向四周均匀的溢散,然后放置在纸盒内的水浴箱中,温度保持在37 ℃,放置时间在3~4 h,然后观察芽管的生成情况[2-3];(2)直接培养法。①取少许菌落混悬于0.5 mL羊血清中;②将试管在35~37 ℃培养,培养时间小于3 h;③培养完毕,取一滴悬液滴在载玻片上,低倍镜下观察有无芽管从胞体生出,宽大约为胞体的一半,长大为胞体的3~4倍;④培养2 h内白色念珠菌生成芽管[4]。
  1.3.3 念珠菌的鉴定 取样品液划线或者涂布与平板上,保持温度在25~28 ℃,放置48 h,白色念珠菌表现为蓝绿色,热带念珠菌表现为铁蓝色或者蓝灰色,光滑念珠菌呈现出紫色,克柔假丝酵母菌呈现出粉红色,其他念珠菌均为白色,详情如表1所示。
  表1 各种念珠菌的鉴定颜色区别
  质控菌株 生长情况 菌落颜色
  白色念珠菌 +++ 蓝绿色
  热带念珠菌 +++ 蓝灰色、铁蓝色
  克柔假丝酵母菌 +++ 粉红色
  光滑念珠菌 +++ 紫色
  其他念珠菌 +++ 白色
  大肠杆菌 - -
  1.3.4 人员操作要求 所有的工作人员必须保持严谨的工作态度,统一经受公司或者医院的专业培训,操作人员的人数确保固定。
  1.3.5 新生儿患感染性疾病诊断 新生儿出生后到出院前3 d的时间段内,婴儿出现感染性疾病,比如感染性肺炎、化脓性脑膜炎、感染性腹泻、脐带炎等均可被诊断为新生儿感染性疾病[5]。   1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料用(x±s)表示,比较采用t检验,计数资料以率(%)表示,比较采用 字2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
  2 结果
  本次所选取的研究对象为1027例晚期产妇,其中经生殖道分泌物检测得出102例孕妇被念珠球菌感染,感染率为9.93%,未被念珠球菌感染的患者为925例,所占比例为90.07%;结果显示,第一胎产前念珠菌检验呈阳性的群体,个体最高,其一般情况如表2所示。
  表2 102例产前阴道念珠菌感染产妇的一般情况 例(%)
  职业 检验呈阳性 第一胎产前阳性
  家庭主妇 51(50.00) 45(88.24)
  干部 22(21.57) 21(95.45)
  个体 16(15.69) 16(100)
  工人 8(7.84) 7(87.50)
  农民 5(4.90) 3(60.00)
  合计 102(100) 92(90.20)
  其中白色念珠菌75例,占所有的念珠菌感染者的73.53%;光滑念珠菌20例,所占比例为19.61%,克柔假丝酵母菌7例,所占比例为6.86%,详见表3。
  表3 念珠菌的感染情况
  菌名 例数(例) 比例(%)
  白色念珠菌 75 73.53
  光滑念珠菌 20 19.61
  克柔假丝酵母菌 7 6.86
  对照组患者即念珠菌检验呈阳性的产妇,所产新生儿发生感染性疾病的有9例,发生率为8.82%。观察组患者即念珠球菌检验呈阴性的产妇,新生儿出现感染性疾病的有2例,发生率为1.96%,两组比较差异有统计学意义(字2=4.7084,P=0.0300)。对照组患感染性新生儿中尿布疹2例,口腔内生白斑3例,嘴角皲裂3例,咽部鹅口疮1例。观察组新生儿2例均为感染性肺炎病。两组患儿均出现死亡情况。
  3 讨论
  念珠菌是一种真菌,其中白色的念珠菌可以导致妇女患阴道炎。它的形状呈卵圆形,有芽孢,同时细胞发芽会形成假菌丝。念珠菌对于日光、紫外线等具有很强的抵抗力,但是不耐高温,一般温度超过60 ℃,时长大约1 h左右,菌体便会死亡[6]。本次试验中检验结果显示假丝酵母菌的病原为白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌以及平滑假丝酵母菌等。
  女性的阴道微生物系统是由机体的内分泌调节、微生态菌群、解剖结构三者联合组成的,如果是生理期或者妊娠期,那么生殖道内部的生态环境就会发生变化,从而引发念珠菌或者其他细菌的感染[7]。因此对于念珠菌的分离、培养鉴定都应该引起医学研究者广泛的关注。
  由于感染念珠菌而导致的阴道炎是一种非常常见的妇科病,其中以妊娠晚期的产妇患病率最高,资料显示,在妊娠晚期的产妇中大约有25%~30%的阴道中有念珠菌[7],本次研究对象的采集过程中,念珠菌检验呈阳性患者的比例为9.93%,远远低于一般水平。念珠菌属于女性阴道的正常菌群,主要感染原因是因为孕妇在妊娠晚期机体的免疫力降低,雌激素分泌过多,然后导致阴道的菌群平衡失调,同时在妊娠晚期产妇阴道的pH值降低,酸性增强,而念珠菌是耐酸性菌群,在酸性环境中生长速度和繁殖速度加快,因此妊娠末期和非妊娠期女性,念珠菌感染差别非常大[8-9]。本次研究中,念珠菌培养呈阳性的产妇为102例,结果显示,阳性率最高的是家庭主妇,主要的原因可能是由于个人的卫生情况有关。以白色念珠菌为主的75例,所占的比例为73.53%,因此由于白念珠菌而引发的阴道炎应该引起人们的重视,从而采取有效的治疗措施。阴道是产妇自然分娩新生儿出生的途径,因此如果有孕妇患有阴道炎,那么很容易造成新生儿发生感染性疾病,另外现在妊娠末期对于产妇来说也非常容易导致胎膜早破等并发症。
  医学技术的不断发展,人们对于生育的观念也有了转变,但是在保证少生优育的同时,医学研究者更应该关注孕妇妊娠和分娩过程中所要面临的问题,特别是由于产妇的妇科疾病从而直接影响新生儿的身体健康。研究表明,新生儿的感染性疾病大部分都是由产妇垂直传播的[10]。比如B型链球菌,简称GBS,它能够使得新生儿体内引发多种感染,比如肺炎、脑膜炎等,而这种病菌多存在于产妇的直肠和阴道之中,因此非常容易传染给新生儿;大肠杆菌可以引发新生儿出现脑膜炎、败血症以及肺炎,主要存在于产妇的大肠内部,同样也非常容易垂直传播给新生儿;主要的临床症状是高烧、精神萎靡、厌食等;念珠菌可以导致新生儿发生感染性疾病,比如尿布疹、口咽部生鹅口疮、嘴角龟裂,口腔内白斑等[11-12]。本次研究中对照组新生儿中尿布疹2例,主要的临床症状会阴部、肛门、臀部,大腿外侧等部位的皮肤发红、充血,严重者出现表皮脱落伴有红斑和丘疹,最严重可能引发败血症。口腔内生白斑3例,主要临床症状就是口腔内的出现白点有痛感,影响新生儿的进食;嘴角皲裂、咽部鹅口疮共4例;观察组新生儿2例均为感染性肺炎病。
  因此对于妊娠晚期的产妇应该频繁地进行检查,做到早发现、早治疗,保证母婴的身体健康。如果在妊娠期被检出念珠菌呈阳性,应该及时进行治疗,避免造成新生婴儿的垂直传播。妊娠期妇女念珠菌感染中,最多的是白念珠菌,其次是热带念珠菌,再次是光滑念珠菌。据资料显示,在所有的新生儿出现感染性疾病中,由于自然分娩导致感染所占比重为22%~24%,其中最主要的表现形式是口腔念珠菌的感染[13]。据医学研究者的研究表明,由于产妇阴道分泌物检测念珠菌呈阳性的,新生儿的皮肤、口腔涂片检测呈阳性率为7.14%,因此可能导致垂直传染率为7.14%[14],本次研究的念珠菌的垂直传染率为8.82%,基本保持一致。为了研究母婴是否真正存在垂直传播,笔者将所筛选的菌株均进行了DNA检测排序,并采用随机扩增DNA多态性分析及染色体核型分析,检测结果表明,所选的菌株形态和生化鉴定结果保持一致,因此表明产妇和新生儿所分离出的念珠菌为同一菌株[15],在对照组发生感染的9例新生儿中,出现鹅口疮的婴儿1例,所占比例为11.1%,因此在以后的临床治疗实践中,确保新生儿降低对念珠菌的感染,一定要对妊娠晚期的产妇进行阴道抗真菌治疗。   本次使用的念珠菌的培养方法采用盐水直接涂片法进行初次筛选,然后使用直接培养方法进行对念珠菌的确诊。盐水直接涂片法(初筛)7元/例、直接培养法38元/例,每年3000~3500人次,每年增加效益13.5~16.5万元[15]。通过对孕妇生殖道念珠菌感染与所产新生儿感染性疾病相关性的回顾性调查分析,了解其中的相关性,并掌握其规律,提出加强围产保健对孕妇生殖道念珠菌感染的监测,提高新生儿生育、生存质量,减少新生儿感染性疾病的发病率与死亡率,为围产期保健提供科学的参考依据,有较高的社会效益和经济效益。
  综上所述,本课题研究有较强的社会及经济效益,课题设计合理,路线明确,步骤清晰,具有相应的人员及设备等条件,而且采用回顾性调查研究的方法,方法简捷,数据可靠,经费节俭,可操作性强,可行性强。
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  (收稿日期:2015-03-19) (本文编辑:欧丽)
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