【摘 要】
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为了建立快速的火腿肠中细菌检测和计数方法,本文采用细菌通用探针EUB338作为标记,优化了荧光原位杂交(FISH)技术检测火腿肠中细菌的方法。比较了三种细胞固定方法,结果表明
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为了建立快速的火腿肠中细菌检测和计数方法,本文采用细菌通用探针EUB338作为标记,优化了荧光原位杂交(FISH)技术检测火腿肠中细菌的方法。比较了三种细胞固定方法,结果表明最佳的样品预处理方法为:4℃4%多聚甲醛固定15 min,46℃热固定2 h;最佳的杂交条件:杂交温度为46℃,杂交时间为3 h,杂交洗脱液浓度为225 mmol/L;优化的FISH方法应用于火腿肠样品的总菌数的检测,并且将FISH方法对火腿肠样品的细菌计数与传统平板计数方法进行比较,结果显示FISH方法相较于平板计数方法检出数高,而且所需时间大大缩短,操作起来更加方便、简捷。本实验充分体现了FISH快速定量的优势,FISH可以作为食品微生物快速检测的一种有效工具。
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