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根据锦鲤疱疹病毒（KHv）胸苷激酶（TK）基因的保守序列设计一对引物和相应的TaqMan探针，建立荧光定量PCR方法，用于锦鲤疱疹病毒快速、灵敏、可定量的检测手段。构建并制备实时荧光定量PCR的标准品，对反应体系进行优化，并做特异性，敏感性和重复性试验。结果表明，成功构建荧光定量PCR标准品，建立荧光定量标准曲线，标准曲线的相关系数为0．992，所建立的荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高，重复性好。