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随着大规模基因组测序的完成和表达序列标签数据库的建立，基因组的研究已由结构基因组向功能基因组转化，而基因功能研究的关键是基因融合技术。为高效率高保真地构建融合大片段的重组载体，本试验利用 In-fusion 技术进行大片段载体构建，以不同的融合时间进行比较，通过细胞转染以及免疫印迹等方法对载体质量进行验证。通过对体系中连接时间的优化，构建出了含插入片段10、8、4 ku 的真核表达载体，并可正确表达。In-fusion 技术的优化，提高了大片段真核表达载体构建的效率，为研究大片段基因的生物学功能奠定了基础