HBVX基因真核细胞载体的构建

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目的为了探讨HBVX基因与慢性乙型肝炎及肝癌发生的关系,构建含X基因的真核表达质粒.方法用PCR方法扩增含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列,对PUC118载体及X基因PCR产物双酶切,用连接酶将两者连接并转化大肠杆菌JM109,称PUC118-HBx,再将PUC118-HBx与PCDNA3.1(+)双酶切,将两者连接并转化大肠杆菌DH5α,称PCDNA3.1(+)-HBx,并对其进行序列测定.结果已构建PCDNA3.1(+)-HBx载体,经序列测定含有完整的X基因片段.结论 PCDNA3.1(+
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