小鼠噬菌体抗体库的构建和N—肽结合单链抗体的筛选

来源 :北京大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dalang003

【摘要】

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成功构建一库容量为１．７＊１０＾８的小鼠噬菌体抗体库，并从中淘选出对Ｎ－肽有结合适性的单链抗体。首先从未免疫小鼠的脾脏中提取总ＲＮＡ，分离出ｍＲＮＡ，经逆转录合成其总ｃＤＮＡ。随后通过ＰＣＲ分别扩增出抗体重链和轻链

【作者】

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高新胜陈玉珍

【机构】

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北京大学生命科学学院,中日友好临床医学研究所

【出处】

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北京大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2000年4期

【关键词】

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噬菌体展示技术抗体库神经肽小鼠 phage display antibody library single|chain F-V N

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目!(396 70 170 ),,高校博士学科点专项科研基金资助项目

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成功构建一库容量为１．７＊１０＾８的小鼠噬菌体抗体库，并从中淘选出对Ｎ－肽有结合适性的单链抗体。首先从未免疫小鼠的脾脏中提取总ＲＮＡ，分离出ｍＲＮＡ，经逆转录合成其总ｃＤＮＡ。随后通过ＰＣＲ分别扩增出抗体重链和轻链可变区ＶＨ、ＶＬ的基因片断，再经重组ＰＣＲ将两片断由一编码（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３十五肽的接头连在一起，并克隆到噬菌质粒ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ中，电击转化大肠杆菌ＴＧ１。经辅助噬菌体Ｍ１３ＫＯ７

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