观察黄连膏对全层皮肤缺损小鼠创面愈合的影响并探讨其相关机制。
方法取30只雄性C57BL/6J小鼠，在每只小鼠背部造成直径为7.5 mm的圆形全层皮肤缺损创面，按随机数字表法将小鼠分为黄连膏组和基质组，每组15只。伤后1 d开始，黄连膏组和基质组小鼠创面分别涂抹黄连膏和基质，2次/d。每组选取5只小鼠，观察伤后0、3、7、10、14 d创面情况并计算创面愈合率。2组均于伤后3、7 d分别处死未行大体观察的10只小鼠中的5只，伤后14 d处死行大体观察后的5只小鼠，取创面组织及距创缘2 mm内皮肤组织，HE染色观察组织形态进行组织学评分，免疫荧光染色观察组织中α平滑肌肌动蛋白(α－SMA)和Ki－67双阳性细胞(肌成纤维细胞)表达，ELISA法检测组织中TGF－β和胶原蛋白的蛋白表达量。对数据行重复测量方差分析、析因设计方差分析、两独立样本t检验、单因素方差分析及Bonferronni检验或校正。
结果(1)伤后0 d，2组小鼠创面均红肿；伤后3、7 d，2组小鼠创面均结痂、无红肿；伤后10 d，黄连膏组小鼠创面面积明显缩小，基质组小鼠创面缩小面积小于黄连膏组；伤后14 d，黄连膏组小鼠大部分创面愈合，基质组小鼠创面尚未完全愈合。伤后3、7 d，2组小鼠创面愈合率相近(t值分别为0.64和1.90，P值均大于0.05)；伤后10、14 d，黄连膏组小鼠创面愈合率分别为(76±7)%、(93±5)%，显著高于基质组的(48±9)%、(68±11)%(t值分别为7.44和3.89，P值均小于0.01)。2组小鼠伤后7、10、14 d创面愈合率均显著高于组内前一时相点(P值均小于0.01)。(2)伤后3 d，2组小鼠创面组织学评分相近(t＝－0.76，P>0.05)；伤后7、14 d，黄连膏组小鼠创面组织学评分分别为(7.0±1.6)、(11.6±2.1)分，显著高于基质组的(4.2±1.3)、(7.2±1.3)分(t值分别为1.96和2.50，P<0.05或P<0.01)。2组小鼠伤后7、14 d创面组织学评分均显著高于组内前一时相点(P值均小于0.01)。(3)伤后3、7 d，黄连膏组小鼠创面组织中α－SMA和Ki－67双阳性细胞百分比分别为(35±12)%、(62±10)%，显著高于基质组的(17±12)%、(34±6)%(t值分别为－2.48和－5.25，P<0.05或P<0.01)；伤后14 d，黄连膏组小鼠创面组织中α－SMA和Ki－67双阳性细胞百分比为(25±5)%，明显低于基质组的(44±17)%(t＝2.50，P<0.05)。黄连膏组小鼠伤后7 d创面组织中α－SMA和Ki－67双阳性细胞百分比显著高于组内伤后3、14 d(P值均小于0.01)，基质组小鼠伤后7、14 d创面组织中α－SMA和Ki－67双阳性细胞百分比显著高于组内前一时相点(P值均小于0.05)。(4)伤后3、7 d，黄连膏组小鼠创面组织中TGF－β蛋白表达量分别为(396±45)、(722±96)pg/mL，显著高于基质组的(290±42)、(382±62)pg/mL(t值分别为－8.17和－6.65，P值均小于0.01)；伤后14 d，2组小鼠创面组织TGF－β蛋白表达量相近(t＝1.60，P>0.05)。黄连膏组小鼠伤后7 d创面组织中TGF－β蛋白表达量显著高于组内伤后3、14 d(P值均小于0.01)，基质组小鼠伤后7、14 d创面组织中TGF－β蛋白表达量显著高于组内前一时相点(P值均小于0.05)。伤后3 d，2组小鼠创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量相近(t＝1.99，P>0.05)；伤后7、14 d，黄连膏组小鼠创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量分别为(47±10)、(70±14)ng/mL，显著高于基质组的(34±10)、(42±12)ng/mL(t值分别为3.15和3.52，P<0.05或P<0.01)。2组小鼠伤后7、14 d创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量均显著高于组内前一时相点(P<0.05或P<0.01)。
结论黄连膏可能通过促进肌成纤维细胞生成，提高TGF－β、胶原蛋白的蛋白表达量，从而促进全层皮肤缺损小鼠创面愈合。