羟基红花黄色素A人工抗原两种制备方法的比较

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目的:对过碘酸钠法和直接法制备的羟基红花黄色素A全抗原进行比较,以期获取理想的羟A人工抗原。方法:通过透析液的颜色变化、紫外扫描、红外扫描及动物免疫试验等比较两种方法合成的人工抗原特点。结果:两种方法制备的人工抗原在紫外扫描中都有蛋白的特征吸收峰,只是受偶联基团的影响特征峰都蓝移到275nm附近,但是直接法的400nm处羟A特征峰保留,过碘酸钠法的消失。对直接法的偶联物进行红外扫描,显示羟A特征官能团的吸收峰和蛋白的特征吸收峰。过碘酸钠法的经过五免老鼠仍然监测不到针对羟A的特异性抗体,用直接法的免疫抗原继续免疫二次产生了抗羟A的特异性抗体,三免血清效价达1:3200;用直接法的免疫两只新西兰大白兔六免抗HSYA抗体效价达1:3200以上。结论:直接法适合制备羟A人工抗原,可以为后续研究奠定可靠的前提条件。
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