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以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应（PCR）扩增出Esat-6基因，连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2．1载体上，将globulin-1-Esat6联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中，构建植物双元表达质粒pCAMBIA1300GEsat-6，电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。通过对pC1300GEsat-6质粒酶切鉴定和测序分析表明克隆的Esat-6与预期相符，酶切从农杆菌中所提的质粒，条带大小与预期结果相符合。