大黄素通过内源性线粒体途径和外源性死亡受体途径诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的研究

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目的:观察大黄素对Hela细胞增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法:倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法检测大黄素对Hela细胞增殖的抑制情况,流式细胞仪检测Hela细胞凋亡,Westernblot检测Hela细胞中凋亡相关蛋白Cytochomec、Apaf-1、Fas、FasL、FADD的表达。结果:空白组Hela细胞呈现典型的多边形和鹅卵形细胞,胞体丰满,边缘清晰,而大黄素处理过的Hela细胞边缘变钝,出现很多皱缩和细小的碎片,表明大黄素对Hela细胞的生长具有毒性作用。MTT法检测结果显示大黄素对Hela细胞的增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性。流式细胞仪定量检测Hela细胞的凋亡结果显示,大黄素在0、20、40、80μM时诱导Hela细胞凋亡率分别为0.8%、8.2%、22.1%、43.7%。Westernblot法检测结果显示,在内源性线粒体途径中,大黄素能够浓度依赖性地增加Cytochromec和Apaf-1蛋白表达;在外源性死亡受体途径中大黄素能够浓度依赖性地增加Fas、FasL和FADD表达。结论:大黄素通过内源性线粒体途径和外源性死亡受体途径诱导Hela细胞凋亡。
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