【摘 要】
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目的 观察精子相关抗原9(SPAG9)对前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)从mRNA水平评估SPAG9在20例前列腺癌与相应的癌旁组织及在人正常前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞株中的表达.应用RNA干扰技术下调SPAG9在前列腺癌细胞株PC-3中的表达,采用RT-qPCR和Western blot方法评估SPAG9基因沉默效果.采用细胞划痕实验和Tr
【机 构】
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目的 观察精子相关抗原9(SPAG9)对前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)从mRNA水平评估SPAG9在20例前列腺癌与相应的癌旁组织及在人正常前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞株中的表达.应用RNA干扰技术下调SPAG9在前列腺癌细胞株PC-3中的表达,采用RT-qPCR和Western blot方法评估SPAG9基因沉默效果.采用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较SPAG9基因沉默前后细胞迁移和侵袭能力的改变.结果 80%(16/20)的前列腺癌中SPAG9的表达显著高于相应癌旁组织,且SAPG9的表达与Gleason评分(P<0.05)和TNM分期(P<0.05)密切相关.SPAG9基因在3种细胞株中从低到高依次为:人正常前列腺上皮细胞RWPE-1、低侵袭性前列腺癌细胞株LNCaP、高侵袭性前列腺癌细胞株PC-3,前两者与后者比较差异均有统计学意义(P<0.01).特异性SPAG9基因的小干扰RNA(siRNA)能够有效沉默PC-3细胞中SPAG9 mRNA和蛋白的表达,同时在降低PC-3细胞中SPAG9表达后,发现细胞的迁移[(41.19 ±7.50) μm比(10.39±1.75) μm,P<0.05]和侵袭[(192.50±26.00)个比(98.65±13.90)个,P<0.05]能力均显著降低.结论 SPAG9基因表达在前列腺癌细胞迁移和侵袭中发挥重要作用。
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