信号肽-canstatin真核表达载体的构建及其在Eca-109细胞中的分泌表达

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目的:构建信号肽-canstatin真核表达载体并在人食管癌细胞Eca-109中分泌表达。方法:利用点突变技术将小鼠纤溶酶原信号肽(SP)序列插入到载体pEGFP-C1EGFP编码序列起始密码的后面,构建pEGFP-C1-SP载体。以pMD18T-Can为模板,扩增小鼠canstatin基因,构建信号肽-canstatin分泌型真核表达载体pEGFP-Cl-SP-Can。用脂质体转染法瞬时转染人食管癌细胞Eca-109。利用Western blotting检测小鼠canstatin融合蛋白在Eca-109
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