胡萝卜软腐欧文氏菌中信号分子合成酶expI基因的克隆、表达及其分析

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用PCR方法从胡萝卜软腐欧文氏菌的基因组DNA中扩增出信号分子合成酶expl基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-28(x(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达expl基因的重组大肠杆菌BL21(pET28(x—expI)。重组菌经IPTG诱导表达,SDS—PAGE检测表达蛋白相对分子质量约为24.8kD,与预期分子量相符。经薄层层析和高效液相色谱分析发现该重组菌产生的信号分子种类为N-3-羰基己酰高丝氨酸内酯和N-己酰高丝氨酸内酯与胡萝卜软腐欧文氏菌产生的一致。
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