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目的 探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系联合Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对血管内皮细胞的特异性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV304细胞株,同时用Survivin ASODN转染同一细胞株,应用逆转录-聚合链反应(RT-PCR)和Western blot检测CDglyTK和Survivin基因的表达,观察两者联合应用对细胞株的杀伤效应和旁观者效应.结果 Survivin ASODN可转染重组腺病毒感染的细胞,并对两者的转染及感染效率无明显影响,CDglyTK可在ECV304细胞株高效表达,Survivin ASODN可明显降低Survivin蛋白表达.单独导入IC50的Survivin ASODN基因,细胞存活率为(55.90±3.61)%,与AdKDR-CDglyTK基因联用后,在GCV 60 mg/L、5-FC 500 mg/L时,细胞存活率明显低于单用AdKDR-CDglyTK或Survivin ASODN(P＜0.05),但在GCV 100 mg/L、5-FC 2 000 mg/L时,联合基因治疗组细胞存活率略低于单用AdKDR-CDglyTK,两者间差异无统计学意义(P＞0.05).联合基因较单一基因对ECV304细胞具有更明显的旁观者效应.结论 KDR启动子调控的CDglyTK融合基因体系和Survivin ASODN基因联合,较单一基因具有更强的特异性杀伤血管内皮细胞的作用。