【摘 要】
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为构建高效表达的纤维素酶基因工程菌,本研究以烟曲霉(Aspergillus fumigatus)基因组DNA为模板,通过PCR扩增出纤维二糖水解酶cbh(cellobiohydrolase)基因,将其连接到原核生物
【机 构】
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甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃省科学院生物研究所厌氧微生物中心,北京市畜牧总站,甘肃农业大学动物医学院
【基金项目】
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甘肃省科技计划项目重点研发计划(18YF1NA077),国家自然科学基金(31500067)
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为构建高效表达的纤维素酶基因工程菌,本研究以烟曲霉(Aspergillus fumigatus)基因组DNA为模板,通过PCR扩增出纤维二糖水解酶cbh(cellobiohydrolase)基因,将其连接到原核生物表达载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)菌株BL21(DE3)中诱导表达蛋白CBH(cellobiohydrolase),同时采用刚果红染色、3,5-二硝基水杨酸(3,5-Dinitrosalicylic,DNS)法测定重组菌株酶活力。结果表明:成功构建表达
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