探索高糖环境下晚期糖基化终末产物（AGEs）是否通过改变肾小球系膜细胞Ros、JC-1及其凋亡相关蛋白的表达，诱导肾小球系膜细胞线粒体途径凋亡及肾小球系膜细胞的损伤。
方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞株HBZY-1，使用不同浓度的AGEs分别培养0、12、24、48 h后，MTT法观察细胞增殖能力。选择AGEs最佳作用时间和浓度后，加入caspase酶抑制剂Z-VAD-fmk及活性氧（ROS）清除剂乙酰半胱氨酸（NAC）进行培养，使用细胞凋亡检测试剂盒和AnnexinV-FITC/PI试剂盒检测细胞的凋亡率，JC-1染色检测线粒体膜电位（MMP）的变化，使用细胞ROX深红流式细胞仪检测细胞内总ROS水平，Western印迹检测抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白BAX表达，并检测caspase-9、caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）活化片段（cleaved）的表达。
结果AGEs可呈时间和浓度依赖性降低肾小球系膜细胞活力，诱导细胞死亡。250 mg/L AGEs作用24 h可显著增加肾小球系膜细胞凋亡率（P<0.01），Z-VAD-fmk可显著缓解AGEs诱导的肾小球系膜细胞凋亡（P<0.01）。与对照组相比，AGEs增加细胞内活性氧水平，降低线粒体MMP，并呈时间依赖性，AGEs引起两者显著改变的作用时间分别为1 h和2 h（均P<0.01）。AGEs还可减少细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达（P<0.01），增加促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达（均P<0.01）。与AGEs组相比，NAC可显著稳固线粒体膜电位（P<0.01），增加Bcl-2表达（P<0.01），减少BAX、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达（均P<0.01）。
结论AGEs通过增加细胞内ROS水平，破坏线粒体膜势能，从而诱导肾小球系膜细胞线粒体途径凋亡。