【摘 要】
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目的 探讨类泛素化蛋白酶8（SENP8）在T细胞活化和分化过程中的作用。方法 C57BL/6背景的Senp8基因打靶小鼠(Senp8F/F小鼠，简称WT小鼠)与同背景的Cd4-Cre转基因小鼠交配，获得在T细胞中特异性缺失SENP8的小鼠(Senp8F/F;Cd4-Cre小鼠，简称KO小鼠)，通过鼠尾基因组DNA PCR以及胸腺细胞免疫印迹实验进行基因型鉴定。流式细胞术分析SENP8缺失对稳态T细
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（82201945）；
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目的 探讨类泛素化蛋白酶8（SENP8）在T细胞活化和分化过程中的作用。方法 C57BL/6背景的Senp8基因打靶小鼠(Senp8F/F小鼠，简称WT小鼠)与同背景的Cd4-Cre转基因小鼠交配，获得在T细胞中特异性缺失SENP8的小鼠(Senp8F/F;Cd4-Cre小鼠，简称KO小鼠)，通过鼠尾基因组DNA PCR以及胸腺细胞免疫印迹实验进行基因型鉴定。流式细胞术分析SENP8缺失对稳态T细胞比例和数量的影响，并以李斯特菌尾静脉注射感染WT和KO小鼠，7 d后流式细胞术分析CD8+T细胞活化、扩增、效应因子表达情况。结果 PCR鉴定结果揭示，KO小鼠有Cd4-Cre基因和纯合的Loxp片段；免疫印迹结果显示，KO小鼠胸腺细胞中的SENP8蛋白表达下降；证明成功构建了T细胞中特异性敲除SENP8的小鼠模型。流式细胞术检测结果表明，CD4+T细胞和CD8+T细胞在稳态WT和KO小鼠脾脏中的比例和数量并无显著差异。李斯特菌感染7 d后，条件性缺失SENP8不影响CD4+T细胞、CD8+T细胞数量增加和活化标志分子CD44表达，也不影响CD4+T细胞、CD8+T细胞中干扰素γ（IFN-γ）和颗粒酶B（GzmB）的表达。结论 T细胞中缺失SENP8分子不影响T细胞的活化、扩增及李斯特菌感染过程中T细胞的细胞毒作用。
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