肠杆菌膜蛋白基因的研究(Ⅲ 大肠杆菌外膜新脂蛋白基因)

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xgw111
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制备含有大肠杆菌外膜脂蛋白(Lpp)信号肽基因的107bp DNA小片段作为探针在20℃下与大肠杆菌野生株JE5506(LPP+)及突变株JE5505(LPP-)的染色体DNA的限制性内切酶Hind Ⅲ降解物进行杂交,前者在10kb处(LPP基因)显示一深的杂交带,而后者没有,但它的3.4kb和25kb Hind Ⅲ片段存在有与Lpp信号肽同源的序列。我们用基因工程技术对这两个片段进行了克隆。25kb片段与pBR322的重组质粒能指令合成一电泳行为与Lpp相同的蛋白质,抗Lpp血清可与其产生免疫沉淀。克隆株膜蛋白电泳图谱出现Lpp区带。Globomycin能抑制Lpp信号肽酶,经它处理的克隆株培养物产生Lpp前体堆积。这些结果表明我们发现的是一新的脂蛋白基因,可能是Lpp的第二基因。

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