降低B7-H3蛋白对受照肺癌细胞A549细胞周期和凋亡的影响

来源 :国际放射医学核医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ziyutianxia
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目的

观察用小干扰RNA(siRNA)敲降B7-H3蛋白的表达对人肺癌细胞A549的细胞周期和凋亡的影响。

方法

培养人肺癌A549细胞,将B7-H3蛋白siRNA瞬时转染于A549细胞(称为siB7-H3转染组)。实验分为4组,即对照组、siB7-H3转染组、照射组、照射+siB7-H3转染组。采用137Cs γ射线一次性照射,照射剂量为4 Gy;用Western blotting法和实时定量PCR分别检测B7-H3蛋白和mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的改变。

结果

与对照组相比,siB7-H3转染组的B7-H3蛋白水平明显降低,mRNA表达量也明显低于对照组且差异有统计学意义(t=-4.222,P=0.013)。siB7-H3转染组细胞的G0/G1期细胞阻滞,S和G2/M期细胞数量减少;与对照组相比,照射组出现轻微的G0/G1期阻滞和明显的G2/M期细胞阻滞,照射+siB7-H3转染组的G0/G1、G2/M期均有明显的阻滞。照射后48 h,与对照组相比,照射组细胞的坏死率和凋亡率明显升高,siB7-H3转染组和照射+siB7-H3转染组的坏死率和凋亡率均无明显改变。

结论

降低肺癌A549细胞中B7-H3蛋白表达水平可明显增加辐射诱导的G0/G1期阻滞,从而提示B7-H3表达水平的改变可能通过调节G0/G1细胞周期检查点而对肺癌细胞放射敏感性产生重要的调节功能。

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