【摘 要】
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目的为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)人源B细胞表位,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达TRP-1的B细胞表位区.方法将本实验室已构建好的质粒pUC19/TRP-1进
【机 构】
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现在解放军第309医院皮肤科,第四军医大学分子生物学教研室,第四军医大学全军骨科研究所
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目的为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)人源B细胞表位,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达TRP-1的B细胞表位区.方法将本实验室已构建好的质粒pUC19/TRP-1进行双酶切,将目的片段亚克隆至带有6His标签的pRSETA载体,将6His融合的TRP-1整体PCR扩增出来,克隆到酵母表达载体pPIC3.5K上,构建成重组质粒pPIC3.5K/6His-TRP1.该质粒转化酵母菌GS115,经G418筛选得到高拷贝转化子.转化菌体经Mut表型鉴定后,用含0.5%甲醇的
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