密度梯度离心法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞的方法学

来源 :中国生育健康杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xingjiena
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目的 探讨密度梯度离心法 (density gradient centrifugation,DGC)富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞的可行性及其在产前基因诊断中的价值。 方法 采用密度梯度离心法富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞 ,以流式细胞分析鉴定富集细胞 ,同时对富集前后孕妇外周血 DNA进行男性性别决定基因 (sex-determining region Y,SRY)检测。 结果  5例孕妇外周血单个核细胞靶细胞群糖蛋白 A (glycophorin A,GPA)阳性细胞富集前平均含量为 0 .0 2‰~ 0 .1‰ ,而富集后平均含量高达 0 .5%~ 2 .8% ;2 4例孕 10~ 40周孕妇 (包括以上 5例 )中 ,孕妇外周血 DNA富集前 SRY基因男性诊断符合率 69.2 % (9/ 13 ) ,诊断总符合率 83 .3 % (2 0 / 2 4) ,而富集后分别为 84.6%(11/ 13 ) ,91.6% (2 2 / 2 4) ,11例怀女胎的孕妇富集前、后均未检出 SRY基因。 结论 密度梯度离心法可从孕妇外周血中富集胎儿细胞 ,且所得细胞已基本满足体外扩增单拷贝基因所需的模板量 ,该方法可应用于非损伤性产前诊断
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