【摘 要】
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用 Nco 和 Bam H 酶切 ,获得人碱性成纤维细胞生长因子 (hb FGF)基因 ,将该基因插入原核高效表达载体 p BV2 2 0的 PLPR启动子下游 ,获得重组质粒 p BV- FGF,转化大肠杆菌DH5
【机 构】
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华东理工大学生物化学研究所国家生物反应器重点实验室!上海200237,华东理工大学生物化学研究所国家生物反应器重点实验室!上海200237,华东理工大学生物化学研究所国家生物反应器重点实验室!上海20
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用 Nco 和 Bam H 酶切 ,获得人碱性成纤维细胞生长因子 (hb FGF)基因 ,将该基因插入原核高效表达载体 p BV2 2 0的 PLPR启动子下游 ,获得重组质粒 p BV- FGF,转化大肠杆菌DH5α,42℃诱导使重组子表达。SDS- PAGE、Western- blot、MTT活性检测结果表明 ,该重组菌能够表达具有生物活性的 hb FGF
The recombinant plasmid p BV-FGF was obtained by digesting with Nco and Bam H to obtain the human basic fibroblast growth factor (hb FGF) gene, inserting the gene into the downstream of the PLPR promoter of prokaryotic expression vector p BV220, transforming into E. coli DH5α induced recombinant expression at 42 ° C. The results of SDS-PAGE, Western-blot and MTT assay showed that the recombinant strain could express hb FGF with bioactivity
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