人胰岛素原类似物(BKRA)基因三联体的构建与表达

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoubujin1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
将人胰岛素原类似物(BKRA)基因通过人工接头串联,形成基因三联体,接头部分的氨基酸序列为RRNSM.该串联基因与表达载体PET?28A(+)重组后,实现了在大肠杆菌中的高效融合表达,表达产物以包涵体形式存在,约占细菌总蛋白的31%.以HITRAP凝胶进行亲和层析初步纯化,纯度可达93%.放射免疫测定表明,纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性,为进一步生产基因工程胰岛素打下了基础.“,”The human proinsulin analog(BKRA)gene molecules were linked tandemly with synthetic nucleotide linker coding RRNSM to form a triplet molecule.The BKRA gene triplet was cloned into pET 28a(+),an expression plasmid,and expressed in E.coli in a fusion protein fashion.The exressed proteins aggregated into inclusion body,and weigh about 31%of the total proteins of the total proteins of the expression bacteria.The expressed proteins are easily purified by HiTrap affinity matrix up to putity of 93%.Human ins...
其他文献
以长春花激素自养型细胞株C20hi及其母株C20D为材料,构建抑制性差减cDNA文库,斑点杂交筛选后对阳性克隆进行测序,共得到104个不同的差异表达基因片段。将这些序列在GenBank中
动脉粥样硬化是一种自身免疫性疾病。人自身热休克蛋白60是主要的自身免疫原之一,能引起人自身免疫性反应进而促进动脉粥样硬化的发生,热休克蛋白65与人热休克蛋白60有较高的
建立以哺乳动物α3β4乙酰胆碱受体(nAChR)为分子靶标的药物筛选模型。将大鼠乙酰胆碱受体的α3与β4亚基基因分别进行体外转录,获得α3与β4亚基基因的cRNA,按1∶1的比例将
制备重组蛋白pET28a-LHRH-PTD-GFP, 利用绿色荧光蛋白GFP, 研究LHRH的介导和PTD蛋白的转膜作用.以重组质粒pET28a-PTD-GFP为模板, 设计含有LHRH基因序列的PCR引物, 经过PCR扩
大鼠Lipocalin13(rLcn13)是最近发现的一个大鼠附睾特异分泌的lipocalin家族蛋白,与男性生殖密切相关.该工作分析了rLcn13的染色体定位和基因特征,用同源模建方法获得了rLcn1
对多株肿瘤细胞的研究表明胃泌素释放肽(GRP)可作为生长因子刺激多种肿瘤的生长,并提示GRP可作为肿瘤免疫治疗的靶点。该研究构建了一系列抗GRP的核酸疫苗以激活针对GRP特异
在系统结构上提出了一种多检测器并行的智能机群入侵检测系统模型,系统中每一个检测器是一个神经网络集成分类检测器,由多个PC组成,以提高系统响应速度。采用两次粒子群优化
HIV-Tat蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)是一个公认的具有介导靶蛋白跨膜作用的肽段.为了表达出可溶的并具有生物学活性的PTD-NGF融合蛋白,作者首先根据人神经
期刊
<正> 我国日前提高了境内外币的存贷款利率,一时间,京城的银行门前排起了储存外币的长队,而炒汇也成为百姓关注的话题。自从交通银行和中国建设银行继中国银行和中国工商银行