【摘 要】
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目的 动脉粥样硬化是一种炎症免疫性疾病,巨噬细胞在动脉粥样硬化的发生发展中起非常重要的作用.巨噬细胞M1/M2亚型平衡的动态变化影响着炎症的转归.本实验通过研究姜黄素对巨噬细胞分型的影响及可能机制,探讨姜黄素抑制动脉粥样硬化发生发展的分子基础.方法 培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞(M0),用常规方法(100 μg/L LPS+ 2.5μg/L IFN-γ干预12 h)诱导成M1型.姜黄素干预细
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院心血管病医院,陕西省西安市710061
【出 处】
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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议
论文部分内容阅读
目的 动脉粥样硬化是一种炎症免疫性疾病,巨噬细胞在动脉粥样硬化的发生发展中起非常重要的作用.巨噬细胞M1/M2亚型平衡的动态变化影响着炎症的转归.本实验通过研究姜黄素对巨噬细胞分型的影响及可能机制,探讨姜黄素抑制动脉粥样硬化发生发展的分子基础.方法 培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞(M0),用常规方法(100 μg/L LPS+ 2.5μg/L IFN-γ干预12 h)诱导成M1型.姜黄素干预细胞浓度为0、6.25、12.5、25 μmol/L.实验细胞模型：(1)上述浓度姜黄素干预巨噬细胞(M0) 12 h；(2)上述浓度姜黄素与LPS和IFN-γ(浓度同上)共同干预巨噬细胞12 h；(3) PPARγ阻断剂GW9662 20 μmol/L提前1h加入25 μmol/L姜黄素干预的M0和M1巨噬细胞,共同干预12 h.选择iNOS、IL-1β、IL-6、MCP-1作为M1型巨噬细胞标志分子,KLF4、FIZZ1和MGL1作为M2型巨噬细胞标志分子,用Real-time PCR和Western blot方法检测.结果 不同浓度(6.25、12.5、25 μmol/L)姜黄素均能减少M1型巨噬细胞标志分子iNOS、IL-1β、IL-6、MCP-1 mRNA表达,能减少iNOS蛋白表达,且呈浓度依赖性(P＜0.05)；不同浓度姜黄素均能增加M1型巨噬细胞PPARγ和IKBα蛋白表达,也能增加M0巨噬细胞PPARγ蛋白表达(P＜0.05)；在姜黄素干预的M1巨噬细胞加入GW9662后,IKBα蛋白仍活化并且M1型标志分子表达仍降低.不同浓度姜黄素均能增加M0巨噬细胞和M1型巨噬细胞M2型标志分子KLF4、HZZ1和MGL1的mRNA表达及KLF4、FIZZ1的蛋白表达,且呈浓度依赖性(P＜0.05)；在姜黄素干预的M0和M1巨噬细胞加入GW9662后,KLF4和FIZZ1的mRNA和蛋白表达部分降低(P＜0.05).结论 姜黄素可能通过活化PPARγ和IKBα抑制巨噬细胞M1型炎症表型,且主要与直接活化IKBα有关；而在其将RAW264.7巨噬细胞极化成M2表型及将M1型逆转为M2型的过程中主要与活化PPAR-γ有关.本实验结果为动脉粥样硬化的中药治疗提供了一定的理论依据.
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