【摘 要】
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目的:研究丹参多酚酸盐(salvianolate)体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用及其可能机制。方法:不同质量浓度丹参多酚酸盐(0.5、1、2mg/ml)与肝癌细胞共培养24h后,流式细胞
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目的:研究丹参多酚酸盐(salvianolate)体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用及其可能机制。方法:不同质量浓度丹参多酚酸盐(0.5、1、2mg/ml)与肝癌细胞共培养24h后,流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡,线粒体膜电位试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位变化;比色法测定1.0mg/ml丹参多酚酸盐作用后肝癌细胞内caspase-8、caspase-9及caspase-3的活性,流式细胞仪检测培养体系内加入caspase-9抑制剂(z-LEHD-fmk)或caspase-3抑制剂(z-DEVD-fmk)后细胞凋亡率的变化,Western blotting检测肝癌细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果:丹参多酚酸盐显著诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡(P<0.05),同时线粒体膜电位随着药物浓度的升高而加剧下降(P<0.05)。1.0mg/ml丹参多酚酸盐处理肝癌细胞24h后caspase-9与caspase-3的活性明显升高(P<0.05),而caspase-8的活性无明显变化(P>0.05);当培养体系内加入caspase-9或caspase-3活性抑制剂后,丹参多酚酸盐诱导肿瘤细胞凋亡的作用明显降低(P<0.05)。Western blotting检测显示,丹参多酚酸盐处理组前凋亡蛋白Bax表达明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论:丹参多酚酸盐(0.5～2.0mg/ml)剂量具有促进肝癌细胞凋亡的作用,且有剂量依赖的趋势,其机制与线粒体凋亡途径有关。
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