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施行此项穿刺，须经主治医师同意，并在富有经验之医师指导下施行，施术前，将患者枕骨部之发剃光，然後将此处按施行外科手术法预备皮肤，令患者侧卧置一小枕於头部之下使头部及脊椎同一平面，头宜稍屈向下，需要时可先作局部麻醉，然後选一“十八号”（18guage）腰椎穿刺用针，以左拇指按住“枕骨结节之底边”（caudal margin of occipital tubercle）右手持针，而于枕骨下沿中线刺入，刺入後将针头向上前方推进，如觉针锋触及枕骨，则稍使之向下，逐渐深入至硬脑膜，一俟穿入该膜即可觉阻力突减，寻常约刺入四至五糎即达“延髓池”，但针锋进入三糎半後每进半糎，即应抽出通管铉一次以视有无液体流出，竭力避免刺入过深而伤及脑髓。