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新孢子虫核酸检测方法的建立及应用评价

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ruyudeishui

【摘 要】

：

以新孢子虫Nc-5 基因为目的基因,建立检测新孢子虫的PCR方法并初步应用.根据GenBank 发布的新孢子虫Nc-5特异性基因序列设计引物,以新孢子虫基因组DNA 为模板,利用梯度PCR法

【作 者】

：

马文晨 李云峰 王琪 李萍 郑夔 王伟利 王景林 赵大力 邹 

【机 构】

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吉林大学公共卫生学院,长春国际旅行卫生保健中心,辽宁国际旅行卫生保健中心,吉林农业大学动物科学技术学院,军事基学科学院微生物流行病研究所、微生物生物安全国家重点实验室,广东出入境检验检疫局检验检疫技术

【出 处】

：

寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

：

2017年2期

【关键词】

：

新孢子虫 基因 小鼠 PCR 核酸检测 Neospora caninum   Genes   Mice   PCR 

【基金项目】

：

质检公益性行业科研专项（201410061）

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以新孢子虫Nc-5 基因为目的基因,建立检测新孢子虫的PCR方法并初步应用.根据GenBank 发布的新孢子虫Nc-5特异性基因序列设计引物,以新孢子虫基因组DNA 为模板,利用梯度PCR法优化反应条件,建立PCR检测方法.以弓形虫、疟原虫、牛环形泰勒虫、包拉米虫和马尔太虫为模板进行扩增以验证建立方法的特异性.采用紫外分光光度计测定新孢子虫基因组DNA浓度和纯度,倍比稀释后的DNA进行PCR扩增,产物电泳分析确定建立方法的敏感性;选择高浓度和低浓度的新孢子虫基因组DNA重复检测3次,分析建立方法的重复性和

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