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目的
探寻原发性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)fimA与kgp基因多态性分布及常见的基因型组合,为筛选Pg毒力株提供依据。
方法从上海交通大学医学院附属第九人民医院牙体牙髓科2013年6月至2015年9月间采集的原发性根尖周炎感染根管样本中筛选34例Pg阳性样本,利用专性引物进行fimA基因扩增分型,同时采用Mse Ⅰ内切酶进行kgp酶切分型。统计fimA与kgp各基因型检出率与常见基因型组合,并通过Pearson χ2检验法分析基因型组合与临床症状的相关性。运用激光扫描共聚焦显微镜观察比较携带不同基因型组合的Pg生物膜结构差异。
结果34例Pg阳性样本中,fimA Ⅱ型检出率最高[47%(16/34)],其次为fimA Ⅰ型[26%(9/34)],fimA Ⅴ型仅检出1例,kgp Ⅰ型的检出率[56%(19/34)]略高于Ⅱ型[44%(15/34)]。其中,fimA Ⅱ型+kgp Ⅰ型和fimA Ⅱ型+kgp Ⅱ型是最常见的2种基因型组合,检出率均为24%(8/34)。特定基因型组合的检出与牙龈肿胀、牙源性窦道无显著相关性(P>0.05)。从样本中分离获得3株携带不同基因型组合的Pg,其分离株A(fimA Ⅰ型+kgp Ⅰ型)形成的生物膜最致密,分离株C(fimA Ⅴ型+kgp Ⅰ型)形成的生物膜较疏松,分离株B(fimA Ⅲ型+kgp Ⅱ型)介于两者之间。
结论原发性根尖周炎感染根管内Pg以fimA Ⅱ型为主,kgp Ⅰ型略多于kgp Ⅱ型,fimA Ⅱ型+kgp Ⅰ型与fimA Ⅱ型+kgp Ⅱ型是常见的两种基因型组合;不同基因型组合可能导致Pg生物膜结构存在差异。