摘要：将从江苏地区筛选出的1株增殖性能稳定猪源JEV JS01毒株作为疫苗，用毒株制备灭活疫苗进行免疫原性研究。试验采用经过细胞传代获得JEV JS01病毒液（1×107.5 TCID50/mL），以甲醛灭活后加入油佐剂，制备猪源乙型脑炎灭活疫苗。腹腔免疫9～12 g小鼠，攻毒保护结果显示对照组小鼠全部死亡，免疫组90%以上健活。分别肌肉注射免疫仔猪及后备母猪，不同时间采集血清测定JEV ELISA抗体。检测结果显示，免疫后试验猪血清抗体效价较免疫前均有显著提高，后备母猪免疫8个月后抗体仍全部为阳性，抗体水平与免疫剂量呈正相关性。试验表明该猪源乙脑病毒JS01毒株具有良好的免疫原性，可以用作疫苗用毒株。
　　关键词：猪源乙型脑炎病毒；免疫原性；灭活疫苗
　　中图分类号： S855.99文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）11-0306-02
　　收稿日期：2015-05-28
　　基金项目：江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（11）2047]；江苏省科技支撑计划（编号：BE2012370）。
　　作者简介：唐波（1982—），男，江苏海安人，硕士，助理研究员，主要从事动物分子病原学及免疫学研究。Tel：（025）84392058；E-mail：2005107058@163.com。
　　通信作者：张道华，研究员，主要从事动物分子病原学及免疫学研究。Tel：（025）84392058；E-mail：zhangdh2005@163.com。流行性乙型脑炎病是由乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus）引起的一种人兽共患传染病[1]。人感染后主要表现脑炎神经症状，但并不传播。猪乙型脑炎病主要表现为公猪睾丸炎、母猪繁殖障碍等，多数猪呈隐性感染并表现病毒血症的形式[2]。患乙型脑炎病以及隐性感染的猪在病毒血症阶段都可成为最主要的传染源，在自然界总构成猪→蚊→人的链式传播[3]。该病的流行给养猪业带来巨大经济损失，每年给我国养猪业造成的经济损失达数十亿元[4]。鉴于感染乙型脑炎的猪是人类乙型脑炎的重要传染源，因此猪乙型脑炎的防治在公共卫生方面也具有极其重要的意义[5]。
　　目前防治猪乙型脑炎病最经济有效的方法仍是接种疫苗[6]。我国预防猪群流行性乙型脑炎与人乙脑防控应用的是同一弱毒株SA14-14-2株弱毒活疫苗，虽然已证实该毒株在人类应用的安全性和有效性[7～8]，但是在猪群中广泛接种人用乙脑减毒活疫苗的合理性、潜在的危害性还是越来越引起人们关注。本研究用经过传代筛选获得1株增殖性能稳定的猪源JEV毒株作为疫苗候选株进行相关免疫原性研究，为研制高效、安全的BHK-21传代细胞系猪源乙型脑炎灭活疫苗打下基础。
　　1材料与方法
　　1.1细胞及毒株
　　BHK-21 细胞系购买自ATCC，JEV JS01毒株由江苏省农业科学院分离、鉴定和保存。
　　1.2主要试剂
　　DMEM 培养基和胎牛血清 （FBS） 购自 GIBCO公司；猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司；乙型脑炎弱毒活疫苗购自上海海利生物药品有限公司。
　　1.3病毒培养及含量测定
　　将细胞生长覆盖率达80%的BHK21细胞培养物，去生长液。按感染复数为0.2%～0.5%接种JEV-JS株F4代病毒液，加入含2