从炎症、凋亡与自噬评价Mtb诱导类风湿关节炎风湿热痹动物模型

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stefanie456
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目的:本研究将从炎症、自噬与凋亡相关蛋白的角度评价灭活结核分枝杆菌(Mtb)诱导类风湿关节炎风湿热痹动物模型,深入探究风湿热痹证模型组大鼠(FSR组)与佐剂性关节炎模型组大鼠(AA组)的区别,为完善类风湿关节炎(RA)病证结合动物模型提供更多的实验依据,以期用于防治RA的药物相关研究。方法:将30只6周龄SD大鼠随机分为3组,每组10只,分别为正常组、AA组和FSR组。AA组与FSR组注射Mtb诱导剂(1 mg/只)建立RA大鼠模型,正常组大鼠尾根部注射等体积生理盐水。FSR组连续干预16 d。实验过程中对比各组大鼠一般情况、体质量、脾脏指数、足趾肿胀度、关节炎指数(AI)、足踝关节与滑膜组织病理学改变、白细胞介素-1β(IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清与mRNA的表达水平、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA与蛋白表达水平、自噬相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬关键分子酵母Atg6(Beclin 1)与p62的mRNA与蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,AA组和FSR组出现毛发枯槁,色泽暗淡,大便稀软甚至湿烂,体质量增长减慢,行动缓慢,脾脏肿大,足踝部关节红肿,关节炎指数升高,足踝关节与滑膜组织均出现不同程度的病理改变,血清与滑膜组织中IL-1β、TNF-α以及滑膜组织中IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平升高,滑膜组织Bax、p62的mRNA和蛋白表达水平降低,LC3、Beclin 1、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平升高。与AA组比,FSR组发病情况更为严重。FSR组大鼠倦怠乏力,懒动喜卧,精神颓靡,体质量增长显著减慢(P<0.01),脾脏指数显著升高,脾脏显著增大(P<0.05),足踝部关节显著红肿,足踝关节畸形,关节炎指数显著升高(P<0.05);大鼠滑膜组织和足踝关节大量炎性细胞弥散,关节腔内大量血管翳充斥,关节破坏显著;血清IL-1β、TNF-α含量(P<0.05)以及滑膜组织中IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);滑膜组织Bax、p62的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LC3、Beclin 1、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:在Mtb诱导的基础上联合外界风湿热环境刺激,可以成功诱导具有RA风湿热痹的动物模型,与AA组相比,FSR组大鼠全身炎症程度加重,滑膜细胞凋亡水平显著降低,自噬水平显著增强,提示FSR组在RA风湿热痹研究中更具有针对性。
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