【摘 要】
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目的探讨小核非编码RNA 7SK在胚胎干细胞(ESCs)增殖中的作用,为原始侏儒症疾病的早期诊治提供靶点。方法利用CRISPR/Cas9系统转染ESCs,通过PCR产物测序和甘油梯度分析鉴定每个单克隆细胞系获得7SK 128-179突变体。使用慢病毒系统敲除CDK9,然后通过Western blotting分析敲除效率和相关通路蛋白的变化。结果CRISPR/Cas9系统转染后,ESCs中出现128-179 nt缺失突变的7SK,该突变导致ESCs增殖缺陷。7SK 128-179 nt突变的ESCs中LAR
【机 构】
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西安医学院第一附属医院,西安医学院基础医学部,西安交通大学第二附属医院,西安交通大学基础医学部生理与病理生理学系,西安医学院临床医学院
【基金项目】
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陕西省西安市科技计划项目(2019115213YX007SF040[7]),陕西省卫生健康科研项目基金(2018D075)。
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目的探讨小核非编码RNA 7SK在胚胎干细胞(ESCs)增殖中的作用,为原始侏儒症疾病的早期诊治提供靶点。方法利用CRISPR/Cas9系统转染ESCs,通过PCR产物测序和甘油梯度分析鉴定每个单克隆细胞系获得7SK 128-179突变体。使用慢病毒系统敲除CDK9,然后通过Western blotting分析敲除效率和相关通路蛋白的变化。结果CRISPR/Cas9系统转染后,ESCs中出现128-179 nt缺失突变的7SK,该突变导致ESCs增殖缺陷。7SK 128-179 nt突变的ESCs中LAR
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